Perfúzní Technika

prokrvení technika umožňuje rychlé a rovnoměrné upevnění do všech jednotlivých buněk přítomných v tkáni. 4 procenta paraformaldehyd upínací prochází přes cévní systém k získání tkáně zájmu. Hlavním cílem místo pro podávání léků v konkrétním orgánu mohou být identifikovány pomocí této techniky. Perfuze také pomáhá vědcům pochopit strukturální a funkční uspořádání lidského mozku. Věci, které budete potřebovat
zvíře (potkan nebo opice)
perfuze čerpadlo, kádinka
fixativ (4 procenta paraformaldehyd)
injekční jehly
perfúze odkapávací stanovené
Nůžky
Skalpel
Kleště
0,9 procenta solný internetu Lední box
Zobrazit další instrukce
1

připravte čerstvý 4 procenta paraformaldehydu smícháním 40 g paraformaldehydu v 800 ml vody. Roztok se přivede na teplotu 60 ° C za stálého míchání. Roztok se ochladí na 4 ° C. Hodnota pH se upraví na 9,5 pomocí pH-metru. Pro nastavení pH, přidejte ledové kyseliny octové pro dosažení požadovaného pH
2

Nastavit perfúzní pumpou. Připojit všechny skleněné části a perfúzní jehlu. Spustit 100ml vody z vodovodu trubičkami perfuze čerpadla odstraňte všechny zbytky ze skleněných dílů. Umístěte kádinku fixační ledové pole.
3

Otevřete konec perfuze trubice a umístěte jej do fixační kádinky. Měřítko množství roztoku v závislosti na velikosti zvířete. Nyní nastavte perfuze ventil čerpadla k pomalým, rovnoměrným kapání. Zavřete ventil. Naplňte perfuze přístroj s 0,9 procenta (hmotnost /objem) solnému roztoku.
4

Nastavte chirurgické nástroje blízkosti operačním stole. Dejte anestezie injekci do zvířete podle jeho tělesné hmotnosti (ketamin 0,5 mg /kg). Položte zvíře na operačním stole s jeho zády dolů.
5

Proveďte řez skalpelem, podél membrány. S velkými nůžky, tupý stranou dolů, snížit pojivové tkáně na spodní straně membrány. Vystavit srdce. Držte tlukoucí srdce s kleštěmi a vložte jehlu do levé komory.
6

Otevřete ventil na perfuzní pumpy, aby tok 0,9 procenta fyziologického roztoku. Ujistěte se, že roztok teče a zvíře je živý. Srdce zvířat by měla být trvale bít. Jakmile je krev nahrazena solným roztokem, změňte řešení 4 procenta paraformaldehydu.
7

zastavit prokrvení a pitvat tkáně zájmu. Uchovávejte tkáně ve stejném médiu při teplotě 4 ° C.