Prvním krokem při bakteriálních přímých barvících postupů je příprava nátěru. Buňky z kultury nebo vzorkem jsou rozloženy v tenké vrstvě na mikroskopické sklíčko a po vysušení se připevňuje pomocí tepla nebo chemickým fixačním. Upevnění skvrnu váže bakterie na snímek a brání jim, že budou odplaveny během barvení řízení. Nátěr by měl být dostatečně tenké, aby pozorování jednotlivých buněk a pevné dostatečně dovolit opakované výplachy při barvení řízení.
Skvrny
Vzhledem k jejich vysokým obsahem vody, mikrobů jsou téměř bezbarvé. Barvení zvyšuje, a ukazuje, jejich různé vlastnosti. Skvrny jsou obecně soli složené z nabitých částic, které se nazývají ionty. Po smíchání s vodou, solnou disociuje kladně nabité kationty a záporně nabitých aniontů. Skvrny jsou soli, ve které jsou barevné buď kationty a anionty. V závislosti na typu iontu nese barvu, běžné mikrobiologické skvrny jsou buď základní nebo kyselý. Základní barevné skvrny obsahují kationty a anionty bezbarvé. Příklady základních skvrny jsou methylenové modři, základní fuchsin a krystalové violeti. Kyselé skvrny mají barevné anionty a kationty bezbarvé. Příklady zahrnují eosin, Kongo červené a nigrosin.
Princip
Bakterie
provést mírný čistý záporný náboj. V důsledku toho se přitahují a vázat kladně nabité základní skvrny. Vzhledem k tomu, že bakterie sám udržet barvivo, proces je přímá metoda barvení. Přímé barvení může být buď jednoduché nebo diferenciální. Jednoduché barvení používá jeden barvivo odhalit velikost, tvar a uspořádání bakterií. Diferenciální skvrna, jako je barvení podle Grama, používá dvě různé barevné základní barviva rozlišovat typy baktérií, navíc k jejich fyzikálních vlastností. Nepřímé, nebo negativní barvení techniky používají kyselé skvrny. Bakterie odpuzují barvu a zůstávají bezbarvý proti skvrnám opěrné pozadí.
Výhody
Přímé barvení bakteriálních buněk je nejčastěji používaná technika pro vizualizaci bakterií. Je to levné, jednoduché a poměrně rychlé. Tato technika poskytuje zdravotnické pracovníky s jednodenních výsledků, potenciální život zachraňující výhoda při diagnostice a léčbě některých infekcí, jako je bakteriální meningitidy. Přímé obarvené skvrny jsou trvalé přípravky, které mohou být znovu přezkoumány na pozdější dobu, pokud je to nutné. Vzhledem k tomu, přímé barvení ničí bakterie, je vaše riziko infekce z manipulace skvrnu snížena.
Copyright © České zdravotnictví Všechna práva vyhrazena