Cell Freezing Protocol

Zachování cely zmrazování je pro výzkum, veterinární medicíny a chovu hospodářských zvířat, protože to umožňuje buňkám, které mají být skladovány po dlouhou dobu. Zmrazení Zvolená metoda je však třeba zabránit nebo omezit poškození buňky. Kryokonzervace prostředek a způsob může záviset na typu buněk. Příprava

Buňky by měly být zmrazeny, pokud jsou zdravé a aktivně rostoucí s 90procentní životaschopnosti. Je třeba dbát na manipulaci a vysokorychlostní odstřeďování a energický pipetování nebo odsávání je třeba se vyhnout udržet životaschopnost a zabránit buněčné poškození.
Cryoprotection

cryoprotection agent použit jako náhrada za intracelulární vody. Činidlo zabraňuje ledových krystalků a dehydratace se vyskytující v buňkách. Sterilizované glycerol a sterilizovány dimethylsulfoxidu se často používají v koncentraci 5 až 15 procent (objem na jednotku objemu) se zředí v obou fetálního telecího séra nebo růstového média, v závislosti na typu buňky.
Tuhnutí a skladování
buňky

v mrazicí směsi by měly být pomalu ochladí. S programovatelnou mrazák není k dispozici, může být zabalen do cryovials tkáni nebo umístěny v polystyrenu, který může zpomalit zmrazování. Buňky by měly být uchovávány na minus 80 stupňů Celsia po dobu 24 hodin a pak se přenesl do kapalného dusíku pro dlouhodobé skladování.
Rozmrazování

mražené buňky je třeba rozmrazit rychle. Vodní lázni při 37 stupních Celsia mohou být použity. Péče by měla být přijata s buňkami uloženými v tekutém dusíku však může jako tekutým dusíkem zadejte lahvičky a může explodovat, na rozmrazování. Mrazicí směs se ředí v růstovém médiu. Životaschopnost buněk by měly být posuzovány s barvivem trypanovou modré a buněk kultivovaných za normální.