protein aktin je velmi přísně, nebo "velmi", konzervované po různých organismů, z mořských řas a bakterií na psy a lidmi. To existuje jako samostatné jednotky, nebo proteinových monomerů, které musí být spojeny dohromady, aby vytvořily větší, kulovitý bílkoviny. Aktin je zapotřebí, aby se vlákna do buněk na buňky pohybu, tak i pro pohyb organel uvnitř buňky. Je proto nezbytné, aby základní buněčných procesů, jako jsou motility a buněčné dělení.
Oblasti výzkumu pomocí aktinu protilátky
protilátky
aktin jsou patří mezi nejvíce běžně a široce používá nástroje buněčné biologie. Jejich aplikace na experimentech s použitím imunohistochemie, Western blot, ELISA a imunoprecipitačních, průtoková cytometrie, má dlouhou a dobře zdokumentovanou historii úspěchu. Většina společností, které vyrábějí a prodávají protilátky pro výzkumné účely vyrobit primární protilátky, které mohou být spojeny s barevnou nebo fluorescenční molekuly, nebo že musí být uznán sekundární protilátkou spojené do jedné z těchto viditelných molekul.
Aktin Protilátka v imunohistochemie a Immunnocytochemistry
aktin je nezbytnou součástí buněčného messenger ribonukleové výroby, tak to je obvykle přítomné ve významných množstvích v jádře. Jeho přítomnost zde může být použit jako pozitivní kontrola pro IHC nebo ICC experimentů. Aktin je detekována s použitím protilátek, které rozpoznávají jeho jednotlivé aminokyseliny. Vizuální pozorování, že aktin protilátka byla zjištěna prokáže, že používaný protokol bylo provedeno správně nebo je formulována. Barvení aktinu protilátek slouží jako pozitivní kontrola pro další barvení protilátek k detekci jiných typů bílkovin, ať už pro účely výzkumu nebo lékařské diagnózy.
Aktinu protilátek v technice Western blot
Western blot je metoda detekce a kvantifikace proteinů pomocí vědeckých postupů, jako je gelová elektroforéza, imunoblot a protilátka hybridizace. Protein zájmu a aktinu proteinu electrophoresced pomocí gelu, který umožňuje proteiny různých velikostí oddělit podél velikosti gradientu. Jednotlivé proteiny jsou pak přeneseny na speciální membránu, kde se znehybní. Aktinu protilátky jsou použity k membráně k detekci imobilizovaného proteinu aktinu, opět slouží jako pozitivní kontrola pro detekci proteinu zájmu. Vzhledem k tomu, známé hmotnosti proteinu aktinu se obvykle používá, je možné porovnat toto číslo, že z proteinu zájmu, a tak určit jeho množství.
Aktinu protilátek v imunoprecipitaci
znovu, protože aktinu protilátky jsou tak běžně používaný a dobře-studoval, jsou jejich unikátní schopnost vázat striktně aktinu a jejich známé velikosti majetku využívána jako pozitivní kontroly v imunoprecipitačních experimentů. Interakce, ke kterým dochází uvnitř buňky mohou být studovány lýze buňky --- usnadnit jejich rozpad --- a sbírají výsledné lyzátu, který je v podstatě "polévka" z různých proteinů. Podle závazných protilátek proti proteinu zájmu a aktin, a pak použití směsi na sloupec, je možné čistit protilátky vázané proteiny a protilátky vázané aktin z jiných nežádoucích proteinů. Detekce aktinu proteinů aktinu protilátky slouží jako důkaz, že imunoprecipitace postup byl úspěšný.
Copyright © České zdravotnictví Všechna práva vyhrazena