Rozdíl mezi přímými a nepřímý test ELISA,

Enzymoimunoanalýzy (ELISA) zahrnuje reakci protilátky a enzymu komplexu s antigenem nebo protilátkou se konala nehybně na pevný povrch. Na inkubaci konjugátu enzym vhodného substrátu, je tvořen produkt. Tvorba produktu pomáhá zjistit přítomnost antigenu nebo protilátky a jejich množství je měřítkem množství antigen-protilátka, která nastala. Test ELISA může být provedena ve dvou formách: přímé a nepřímé. Test Formát

přímé ELISA testu, se primární protilátka držel na stěnách mikrotitrační destičky. Když vzorek podezření, že obsahují antigen se přidává, je antigen-protilátka. Dále se přidá enzymem sekundární protilátka, která je schopna reagovat s antigenem. Je-li antigen je přítomen ve vzorku, se váže na tento enzymově protilátky. Když je bezbarvý substrát, pokud zabarvení, znamená to, že se přítomnost antigenu. V nepřímé ELISA antigen se koná na stěnách na mikrotitrační desku. Při podezření, že vzorek obsahuje protilátky se přidá, antigen-protilátka reakce. Dále se přidá enzymem sekundární protilátka schopná reakce s nevázané oblasti protilátky. Po přidání bezbarvý substrát, to vede k rozvoji barvy, pokud je použit vzorek obsahuje protilátky.
Snadné testování
fotografie

širokou škálu značených sekundárních protilátek jsou komerčně k dispozici. Kromě toho, že je možné vytvořit několik primárních protilátek u určitého druhu a stejným sekundární protilátky pro detekci. To je nepřímý test ELISA, snadno proveditelné. V ELISA testu, primární protilátky musí být zvlášť připraveny reagovat se specifickým antigenem podezření, že je přítomen ve vzorku. To je přímé ELISA nevýhodné v porovnání s nepřímým testem.

Rychlosti Testování

přímé ELISA test je rychlý ve srovnání s nepřímým testem, protože používá pouze jednu protilátku. Nepřímý test ELISA vyžaduje další krok inkubace s druhou protilátkou během zkušebního postupu, což způsobuje zpoždění při získávání výsledků.
Citlivost

přímé ELISA test je méně citlivé než nepřímé formě testu, protože je mnohem menší zesílení signálu. Kromě toho, může být označení na primární protilátky s enzymem, narušit jeho immonoreactivity profil. V případě nepřímého testu ELISA, se primární protilátka není označen, a proto, že si zachovává svůj imunoreaktivitu. Kromě toho, každý primární protilátka má mnoho epitopů, které mohou vázat se sekundární protilátkou, což umožňuje zesílení signálu, zlepšení způsobu citlivost. Nicméně, tam je šance na křížové reaktivity mezi antigenem a sekundární protilátky, což vede k chybě ve výsledcích. Není tam žádná taková možnost v přímém metodou ELISA.